BioBond组织粘合剂
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组织切片粘合剂
对免疫组织化学来说,样品制备的选择对样品抗原的保存非常重要。在制备过程中,样品定影和嵌入是最重要的。协议必须满足保存结构完整性和抗原性的要求。
为什么要涂片?
准备好用于免疫标签的组织样品后,有必要用旨在最大化特定信号、最小化背景的协议完成孵化。有些孵化条件可能造成组织切片与载玻片分离。典型的组织切片粘合剂,如多聚赖氨酸、Elmer胶、铬明矾等并不适宜用于免疫金标签,这是因为把金粒吸附到载片粘合剂所造成的背景增加。
此外,载玻片表面并不平整,是硅四面体活性结构。它为吸收蛋白质或化学试剂反应提供活性中心。因此,通过使用低活性的物质对表面进行涂片以把这种可能性减至最小就非常重要。BioBond使玻片和组织切片在后面的孵化中紧密粘合。BioBond在载玻片表面涂上保护层,以使玻璃表面与试剂之间的反应降至最小。而且由于不同来源和不同国家载玻片之间的差异,这对结果的再现也特别重要。它对恶劣的孵化条件特别有效,如原位杂交。
涂片程序简单
用BioBond涂片并不复杂。如下协议能涂片100载玻片或更多。操作BioBond时请戴上一次性橡胶手套。
1. 在(金属或塑胶)支架上装上载玻片。每架25个最为适宜。
2. 把支架置于2%的Decon清洁液中,浸泡一个小时。
3. 用自来水彻底冲洗,除去所有Decon。如果当地自来水不干净或非常硬,则使用蒸馏水。
4. 在室温下或40癈风干载玻片。盖上防止灰尘。
5. 准备2%的BioBond丙酮溶液(100ml中2ml)。通用试剂就行。
6. 把载玻片在BioBond溶液中浸放4分钟。
7. 在干净的自来水或蒸馏水下冲洗5分钟。
8. 风干。
9. 在需要使用前,把载玻片置于绝对干燥的无尘环境中贮存(通常置于最初的载玻片盒中)。
载玻片可随时用于封固切片。它们可以无限期贮存。用这种方法,100ml 2%的BioBond溶液能涂层至少100载玻片。
BioBond适用于各种组织标本,包括石蜡或树脂切片、细胞涂片、冰冻切片。BioBond每单位容积20ml,足够涂层至少1000载玻片。
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Thursday September 02, 2010
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