
SPI-Chem Araldite®嵌入树脂套装
使用说明
简介:
Araldite® 502
是一种环氧嵌入树脂,嵌入物呈浅金色,聚合既不收缩也不扩张。嵌入Araldite 502的组织可以用任何常用有机溶剂脱水。然而,如果使用乙醇(酒精)或甲醇(木精),则需要使用一种过渡性溶剂,如环氧丙烷,因为残留的非活性醇会影响切片质量。嵌入时,Araldite的粘性比甲基丙烯酸酯略高,但可以通过提高温度来降低粘性。
嵌入协议规划:
反复准备,却只得到“不太完美”的结果,没有比这更令人沮丧的了。我们要指出的是,嵌入协议的选择往往基于:
1.预期硬度
2.避免过热的聚合时间
3.达到预期聚合所需要的热量。
一般来说,加入过量的DMP-30,可以加快聚合速度,但代价是聚合物脆弱易碎。缓慢的聚合所形成的聚合物更加均匀。
Araldite 502套剂推荐程序:
固定:
用四氧化锇、戊二醛或其它合适的定影液固定组织。
脱水:
将组织置于以下交换溶液中:
50% 乙醇,20分钟
75% 乙醇,20分钟
100% 乙醇,20分钟
100% 乙醇,20分钟
100% 环氧丙烷,15分钟
100% 环氧丙烷,15分钟
树脂混合:
推荐配方:
量大时,按比例增加。
成分混合:
这种树脂溶液需要彻底混合20分钟左右。通过改变加入到Araldite 502中的硬化剂(DDSA)的比例,可以改变聚合物的最终硬度。
促进剂(DMP-30)的微小变化,能大大影响聚合物的色泽和脆度。
这种混合物在30C(86F)以下能存储长达6个月。
渗透:
旧环氧丙烷的干燥组织
在室温下,把组织浸入含2ml环氧丙烷和2ml树脂溶液的的溶液中。另外加入2ml树脂溶液,摇动均匀,在室温下放置3-6小时。
嵌入:可以在胶囊中进行。如果使用胶囊,必须在烤箱中对胶囊进行预先干燥,除去所有水分。用于嵌入,胶囊必须填入树脂溶液。组织必须干燥,而后置于胶囊中树脂溶液的顶部。随着组织通过树脂溶液,所有溶剂残迹都将被清除干净。把填满的胶囊加热到60C(140F)至少16小时,可实现树脂溶液的聚合。或在第一天晚上加热至35C(95°F),第二天加热至45°C(113F),第二天晚上加热至60C(140F)。
聚合物冷却至室温后,可进行修剪和切片。
参考书目:
Glauert and Glauert, J. Biophys. Biochem. Cytol. 4:191 (1958).
Luft, J. H., J. Biophys. Biochem. Cytol. 9:409 (1961).
Hayat, M. A., Principles and Techniques of E. M., V. I., 2nd Edition,
University Park Press, Balitimore, 1981.
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Tuesday February 07, 2012
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