SPI-Mark™ 胶体金试剂

金标简介

金标简介

历史
50多年前，最初用显微镜检测组织抗原时，用荧光素标记抗体。1970年，用酶作标记比荧光标记染色更清晰，更稳定。1971年，随着金标的出现，高敏感性、高清晰度的电子显微镜免疫细胞化学成为可能。后来发展的银加强法使得在光学显微镜下，用金标观察抗原更加清晰和敏感。　

自从被引入显微镜领域，金标已经成为非常重要的工具，同其它技术，如吸渍法、血细胞流、杂交、DNA指纹鉴定等，一同用来探测和计量蛋白质、抗原、核酸。

最近，金标在快速免疫测定中有了新的用途。在该技术中，通过观察获取了抗原的膜横截面，或者溶液中的红色浓度，就能发现金标堆积的独特红色，从而极为敏感地检测出溶液中微量的蛋白质。

金探针
金标用来标记那些用肉眼和其它探测系统无法观察到的分子。胶体金标液是涂有某种蛋白质或高分子（如抗体）的金粒悬浮液。金粒大小可以根据需要制作成1-250nm。使用这种金探针系统，潜伏于确定目标中，如组织截面，通过观察金粒本身就能观察到目标。　

在电子显微镜下，不需要进一步的处理即可观察到金粒。而在光学显微镜下，需要经过简短的银加强程序才能观察到金粒。通过用肉眼观察金溶胶所积聚的红颜色，也能观察到固体（如吸渍膜）中静态的蛋白质。银加强法使金标探测的灵敏度更高。

结合
蛋白质与金粒的结合至少取决于三个物理现象：

带负电的金粒与带正电的蛋白质的电荷吸引

金粒表面与蛋白质的疏水吸附

金与硫磺的结合，可能存在于大分子结构中。

金可以与多种分子结合，包括蛋白质(如抗体)、多肽、糖类、聚合体、多糖、酶、核酸。金标液的制作条件对其性能和稳定性的影响非常大。

为什么选择金呢？
不管是用显微镜还是非显微镜探测目标分子，用金进行标记都有不少优点。

粒子大小可以进行选择，使得用显微镜研究抗原的放大倍率可在较大范围内调整，同时使得对组织截面抗原进行多重标记有了可能。在电子显微镜下，用金粒做标记那是毋庸置疑的。金标不太容易被混淆成其它组织结构，因此在EM与LM中，金标的清晰度比其它方法标记都要高得多。

荧光标记和以酶为基础的显色反应都会随着时间的推移和曝光而褪色，而金标并不会消失，会永久保持。由于金标的微粒特征，使得电子显微镜下的计量成为可能，甚至在用不同大小的微粒进行多重标记的情况下，可以计数多个抗原。在光学显微镜下，经过对金信号的银加强而生成的强褐或黑染色，敏感性和清晰性都比其它免疫细胞化学方法要强得多。而且，组织可以经普通染色程序进行再次染色。

与以酶为基础的探测系统不同，金探针无毒、安全、使用方便。配制好的金标液稳定性好，不管是冷冻还是在4C存储，其保存期限都非常长。对膜上固定的蛋白质进行染色，金探针的敏感性和清晰度都是无可比拟的。最后，可能让您惊讶的是，金探针在应用中并不昂贵，其高敏感性使得贵重的原始抗体可以被大大稀释。

SPI-Mark金标液尺寸分布

高质量的决定因素？ 要使金探针成为实验和诊断研究的高质量试剂，有如下几个特征必须符合：

抗体和蛋白质
从原材料开始，所有用于金标液抗体和蛋白质必须是亲和纯化的，质量最好的。它们对抗原必须有非常强的亲合力，能坚决抵挡住剧烈的孵化和清洗条件。交叉反应必须尽量减少。我们只用质量最好的抗体和蛋白质来制作SPI-Mark试剂，正是这样，我们的产品始终如一地值得信赖。在SPI包装和运输中也是如此，该产品只通过快递公司冷冻运输，以确保运输过程不发生意外，顾客收到完好产品。

金胶体
我们实验室专有技术不断发展，制作颗粒变异系数最低的纯金银胶体，意味着我们不断生产高质量、高性能的金标液。

敏感性和稳定性
用免疫标记探测细胞和组织中不多的抗体，敏感性显得特别重要。为了使金探针在比较弱的背景下产生明显的特殊信号，抗体和金微粒必须完全结合，在种种孵化条件下都能保持稳定。金微粒对其所结合的抗体的活性影响必须最小，但却必须能长时间强有力地吸附于其表面。金标液在长期存储时可能冷冻，但抗体活性并不减小。所有标准SPI- Mark金标液都能长期冷冻存储，而不变质。　

聚合
对电子显微镜来说，低聚合是非常重要的，特别是需要进行计数或需要高质量显微图时。聚合意味着蛋白质由金微粒串联吸附在一起。高聚合金标液稳定性低，敏感性差。金标液至少必须含有85%以上的单体，而且，每个聚合体不能超过三个。所有SPI-Mark EM等级金标液都符合此规格。

质量保证
在SPI-Mark金标液生产的所有阶段都有严格的质量保证程序，以确保产品完全符合所有标准，有着最高性能。

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