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SPI-Chem™低粘性"Spurr"套装

使用说明


英文版




注意:

使用套装前,请通读容器标签上的所有说明与警示。

Spurrl低粘性嵌入系统能很好地渗透样品材料。其它有用特征:
*在环境温度下,树脂混合的交联和/或自我聚合最小。

超薄切片在电子束下非常稳定,通常可装裱于200目网格,而不需要支持膜。生物标本切片容易用乙酸双氧铀和柠檬酸铅溶液染色。用磷钨酸染色,效果也不错。

原来的SPI-Chem Spurr低粘性配方基于四种成分,但请注意,现在提供的套装,用ERL 4221代替ERL 4206,在本页稍后有介绍:

  1. 二氧化乙烯基环苯(ERL 4221),脂环族环氧化物,分子量为1402,相当的环氧化物(WPE)为74-78。


  2. 聚丙二醇二缩水甘油醚(DER 736),增韧剂,WPE为175-205。通过调整DER 736的量可控制固化树脂的硬度。


  3. 壬烯基琥珀酸酐(NSA),硬化剂,分子量为224。 尽量减少与大气中的水分接触。


  4. 二甲基氨基乙醇(DMAE),推荐固化加速剂,使树脂混合物的使用期限延长。调整DMAE的量,可调整固化时间。如果要更快固化,使用苯甲基二甲胺(BDMA)DMP-30

由于安全原因,如果不是还有其它原因,ERL 4206的制造商在2003停止了生产。我们知道有些公司仍然继续供应标签为ERL 4206的瓶子,然而,就我们所看,我们能确定真正销售的是ERL 4221或一些其它化学化合物。ERL-4221是二氧化乙烯基环己烯。

EPON® - 壳牌化学公司产品
ARALDITE® - Ciba产品公司产品
SPI-Chem™ - 是Structure Probe, Inc.分公司SPI Supplies的商标名称


配方:

改良(ERL 4221)嵌入配方如下表所示:
标准(坚固的)块组成中的Spurr成分重量(克)
成分 重量,g
ERL 4221 20
DER 736 16
NSA 50
DMAE 0.6


混合使用ERL 4221配方的成分:

制备(坚固的)标准配方程序

树脂成分的制备和混合必须充分,并一直在通风橱中进行。
  1. 称一次性塑胶烧杯皮重,加入86.6 g到横梁(使用的成分总重量)。
  2. 往烧杯中缓慢倒入50 g NSA,用抹刀或搅拌棒加入最后几滴。
  3. 用一次性注射器往烧杯中加入20 g ERL 4221。
  4. 用一次性注射器往烧杯中加入16 g DER 736。
  5. 最后,往烧杯中加入0.6 g DMAE,从天平上移开,立即搅拌约3分钟。
  6. 将烧杯置于干燥器中。这将使混合物自己释放出气泡,更充分混合。
  7. 如果时间间隔缩短,将混合物轮流在真空与空气中放置,直到消除气泡。
  8. 由于使用期限长(3-4天),混合物可在使用前一天制备。

如果要大量制备,按照上述的方式(步骤1-7)将成分称入长颈瓶中,然后塞住,并在适当的间隔用力摇动长颈瓶,直到完全混合。

混合的嵌入介质可以冷藏数月之久,在有封口的一次性注射器中储存以防止湿气,然后将一次性注射器放入标有硅胶的密封容器中。

“基于ERL 4206的原嵌入配方”如下表所示:

Spurr 成分重量
成分
“原配方” 坚固
ERL 420610.010.010.0
DER 7366.04.07.0
NSA26.026.026.0
DMAE0.40.40.4

混合树脂成分(基于使用ERL 4206):

制备坚固的标准配方程序
制备和混合树脂成分必须充分,并一直在通风橱中进行。
  1. 称一次性塑胶烧杯的皮重,在横梁上上加入42.4克(使用成分的总重量)。
  2. 将26克NSA缓慢倒入烧杯,用抹刀或搅拌棒加入最后几滴。
  3. 用一次性注射器往烧杯中加入10克ERL 4206。
  4. 用一次性注射器往烧杯中加入6克DER 736。
  5. 最后,往烧杯中加入4克DMAE,从天平上移开,并立即搅拌约3分钟。
  6. 将烧杯放入干燥器中。让混合物自己释放气泡,混合更加充分。
  7. 如果时间间隔缩短,将混合物轮流放在真空和空气中,直到气泡消除。
  8. 由于使用期限长(3-4天),混合物可在使用前一天制备。
如果要大量制备,按照所述的方式(步骤1-7),将成分称入长颈瓶中,然后塞住,并以适当的间隔用力摇动长颈瓶,直到完全混合。

混合的嵌入介质可以冷藏数月之久,在有封口的一次性注射器中储存以防止湿气,然后将一次性注射器放入标有硅胶的密封容器中。

制备嵌入标本:

脱水:
用等级系列脱水液对标本进行脱水:乙醇、甲醇、丙酮、叔丁醇、二氧杂环乙烷、环氧丙烷、异丙醇、己烯乙二醇。这些液体必须无水,完全无湿气。

渗透:
用全部树脂混合物进行渗透。渗透过程中,室温下,在旋转器或实验室混合器上不断摇动混合物。从脱水液到嵌入树脂的转变,可通过对全部树脂的几次更换进行,或用脱水液稀释树脂,在适当的间隔浸透,使达到100%树脂混合条件。对于大型标本,照上述渗透,并在100%的嵌入介质中室温下浸泡一整夜。

嵌入:
将标本放入BEEM® 扁平嵌入模具SPI Supplies 硅树脂嵌入模具或甚至是含有Spurr介质的凝胶胶囊,并确定方向,如果 需要的话。可在模具或胶囊的嵌入介质上添加识别码。

固化:
小心调节烤箱温度至70癈。将嵌入标本轻轻放入烤箱,固化一整夜(8-16小时)。

参考文献:
1Spurr, A.R., J. 超微结构研究,26, 311 (1969)

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Monday March 15, 2010
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