SPI-Chem™亚甲基蓝应用

在Castaneda染色中使用，用于原生小体和病原体

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常常会被称作“衣原体染色”。

程序包括混合两种溶液，溶液A和溶液B，将A和B与甲醛混合制备染色溶液。单独的步骤包括制备番红精-乙酸溶液。

详细资料如下：

试剂制备协议

溶液 A


无水磷酸二氢钾     1 g

磷酸氢二钠	25 g

蒸馏水		1000 ml

甲醛 		1 ml

将磷酸二氢钾溶于100 ml蒸馏水，将磷酸氢二钠溶于900 ml蒸馏水。混合两种溶液，形成缓冲液，加入甲醛作为防腐剂。

溶液 B


亚甲基蓝		1g

甲醇		100ml

染色溶液


溶液 A		20ml

溶液 B		0.15ml

甲醛		1ml

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番红精-乙酸



番红精 (0.2% 水溶液)       1 部分

乙酸 (0.1% 水溶液)         3 部分

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使用协议


* 从感染组织准备薄膜，在空气中干燥

* 染色3分钟

* 排水，不冲洗

* 在番红精-乙酸中复染色1-2秒

* 用自来水冲洗，干燥印迹。

染色结果：
鹦鹉热的病原体、原生小体染成蓝色；细胞核和细胞质染成红色。

本页所载内容来自生物染色和染色方法，BDH 传单，1966.

Castaneda原技术的几处修改：
Langeron, M., "Pr閏is de Microscopie", 1934 和 1948.

病原体、考克斯体、衣原体的其它染色剂(Macchiavello 和 Gimenez):“染色程序”, p. 412-416.

特别感谢Yvan Lindekens，于1998年7月22日，在组蛋白邮件列表服务器记录上，突出显示这一宝贵程序的详细资料。

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