“Sato铅”配方

多年来屡经改进的流行染色剂

这种染色剂，通常被称作“Sato铅”或“Sato染色程序”，广泛用作TEM薄切片的常规染色剂。通常在双氧铀染色后使用铅溶液，以形成高对比度，并对许多细胞和组织成分进行染色。

基本染色程序最先由T. Sato公开，电子显微镜杂志 17, 2 , 158 (1968)。该方法事实上肯定受到Watson在1958年所发表的早期作品的影响。

其他变化的其他参考文献：
Karnovsky, M. J.,“电子显微镜下，高pH值，用铅染色的简单方法”J. 细胞化学、细胞物理学、细胞学 11, 729 (1961).

Millonig G.,“薄切片铅染色的改进程序”，J. 细胞物理学、细胞化学、细胞学 11, 736 (1961).

Reynolds, E. S.,“在高pH值下使用柠檬酸铅作为电子显微镜电子不透明染色剂”，J.细胞生物学 17, 208 (1963).

Venable, J. H.,和 Coggeshall, R.,“用于电子显微镜的简化柠檬酸铅染色”，J.细胞生物学 25, 407 (1965).

Fahmy, A.,“用于电子显微镜的临时柠檬酸铅染色”，Proc. 25th Ann. Conf. EMSA, p.148 (1967).

Sato T,“薄切片铅染色的改进程序”，J.电子显微镜，16:133 (1967).

原始配方如下：

1gm 硝酸铅

1gm 醋酸铅

1gm 柠檬酸铅

2gms 柠檬酸钠

溶于82 ml蒸馏水，加入18 ml 4%的NaOH，pH值为12。如果溶液呈乳白色，则非常合适! 溶液应冷藏存放。

使用时，加入18 ml刚配制的(从颗粒)NaOH(1N)。溶液将透明，除了底部有些大颗粒或沉淀物。迅速过滤并储存，密封于深色瓶中，建议用塑胶瓶，不要用玻璃瓶。

该配方/协议的现代版如下：

0.20 gm无水柠檬酸铅 Pb(C₆H₅O₇)₂ (FW = 1053.85)*

0.15 gm 硝酸铅

Pb(NO₃)

0.15 gm 醋酸铅

Pb(CH₃COO)₂H₂O 1.00 gm 柠檬酸钠 Na₃

(C₆H₅O₇)H₂O 41.0 ml 蒸馏水

*我们建议用SPI三水柠檬酸铅代替 - 0.21g FW = 999.85)

上述配方来自以下出版物：
Hanaichi, T., Sato, T, Hoshino, M.,和 Mizuno, N., Proc. XI 国际电子显微镜大会 (ICEM),京都 1986.

将上述成分置于50 ml容积瓶中，适当混合，成淡黄色乳状溶液。然后加入9.0 ml 1 N NaOH，适当混合，直到溶液变成淡黄色透明溶液。冷藏存储。混合溶液的有效存储期限约为1年。

关于程序的其它参考文献：

1. 电子显微镜杂志116, 133 (1976)

2. Hanaichi, T., et. al.,Sato方法改进的稳定铅，电子显微镜杂志 35, (304-306) 1986.

3. Takagi, I., et. al.,改良Sato铅染色溶液可染性的突破，电子显微镜杂志 39, (67-68) 1990.

实际使用观察资料：
准备使用时，如果溶液顶部有白色沉淀物，除去染色溶液中的沉淀物。也可以在使用前用微量离心机除去沉淀。碳酸铅沉淀外形为黑圈(约100- 200 nm)，通常一侧粗糙或呈锯齿状。如果沉淀物更像“胡椒粉”，即尺寸小，则可能是醋酸双氧铀，而不是碳酸铅。磷酸盐缓冲液也可能看起来像“胡椒粉”，但颗粒通常有点暗。醋酸双氧铀沉淀时常具有亚细胞结构，如膜、核糖体等；磷酸盐沉淀通常在细胞质中，您可能以为是水。

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