SPI-Mark™ 银加强试剂盒

用于光学和电子显微镜

LM/EM银加强试剂盒

SPI-标记的银加强试剂盒为放大光学显微镜、电子显微镜、印迹应用的免疫金标签样品提供操作简单、灵敏的系统。银加强发生在有金粒的场合，银被一种溶液(如原始溶液)从另一溶液(如加强溶液)中减少的过程。减少反应让银能优先粘附于金粒的表面，而金粒与目标样品上的抗体、蛋白质、和其他高分子是成对出现的(如粘附)。

银加强速度非常快，但是容易控制，而且时间跨度合理(如几分钟)。把金粒信号放大10-100倍很容易(按程序)达到。加强反应对光不敏感，用水冲洗即终止反应，不需要固定。对大多数研究者来说，做这种工作的学习曲线往往比EM技术更长，我们设法整理一些线索以缩短学习曲线的过程。

光学显微镜

样品可能是裱在载玻片、细胞单层或组织切片上的组织、细胞、涂片、染色体等的免疫金标记部分。由于显微镜的清晰度有限(> 400nm)，小的金粒在LM下观察不到。样品进行免疫金标记，用水冲洗后，只要有溶液，即能轻易进行银加强。最后会在金标上形成深褐色或黑色的污点。参见光学显微镜SPI-标记金探针。

1nm和5nm的免疫金标签的银加强效果都不错，1nm 金标对于细胞渗透特别有用。在5-10分钟后，通常能进行足够放大，反应过程可在显微镜下进行监控。把各种溶液混合，并涂于载玻片，即能进行加强。

把盖玻片放在适当的位置，即能对反应进行高放大倍数的观察，即使浸入油中也行。用水冲洗，反应即终止。如果需要继续进行的话，换上新鲜的溶液即可。

LM/EM银加强试剂盒足够在载玻片上使用至少300次。冲洗过后，载玻片又能进行复染色，正常使用。由于金粒上银增长的不连续性，因此并不会发生信号的扩散。银污点生成持久的、清晰的、对照鲜明的不褪色的标签。

表射偏振光

与光学显微镜下的昏暗背景相比，在表射偏振光下，金、银加强的信号要光亮得多。在这种情况下，金粒银加强形成的完美球形银“镜”会反射表射偏振光源（通常是UV）。参见光学显微镜SPI-标记金探针。与普通光照相比，灵敏性增强了10倍。这意味着需要较低等级的金粒来进行观察，以生成好得多的背景信号。大多数现代光学显微镜装上表射偏振光并不难，而且成本也不高。

电子显微镜(TEM)

所有电子显微镜样品上的金标签 (参见用于EM的金结合物) 都能用LM/EM银加强试剂进行有效加强。在由于组织抗原级别低，因而标签强度低，必须使用1nm或5nm金结合物的情况下，电子显微镜的银加强特别有用。对于这些小颗粒，我们有最好的标签强度，但是颗粒可能并不容易观察到，特别是在放大倍数有限的电子显微镜下。然而把携带有这些超细颗粒的EM方格漂放在一滴加强溶液中，几分钟后，颗粒就会变大，能在很低的放大倍数下观察到。这些颗粒能增长到50nm以上，放大10,000倍或更低就能观察到。因此，免疫标签能在更广的样品范围内被观察到，而不需要高放大倍数。金粒以标准球形方式增长，但当相邻的颗粒触碰到一起时，便会熔合成椭圆形。技术非常简单，因此样品可以反复加强，直到颗粒达到所需要的大小。

扫描电子显微镜(SEM)

对于SEM研究，所有的金粒都能用于免疫金反应，这些金粒会增大(如50nm)，用背向散射电子扫描或X射线映射观察较为方便。对小的金粒，如5nm，进行银加强以标签SEM样品，比使用大的金粒直接进行观察要好，因为前者的标签强度更高。

测试带

每个试剂盒配有一盒测试带，测试带已经用系列不同浓度的金结合物进行点染色，以标识内容递减的蛋白质。五个点上的金粒，分别与10ng, 1ng, 100pg,10pg,和1pg的蛋白质相结合。往试管中同时增加5-10滴原始液和增强液(注意银加强试剂需要预先达到室温，使用前摇动瓶身)。即可测试试剂的灵敏度。这些点将变色，从粉红或无色-黄色-橙色-浅褐色-深褐色-黑色。所有的5个点最终都会被玷污(约20-30分钟)。测试带用来判断试剂在长期存储后的稳定性。

LM/EM银加强试剂一瓶原始液和一瓶增强液

SPI # 单价/套库存

2 x 15ml 04180-AB $ 158.00 Yes

测试带 (Pk of 10) 04181-AB 35.90 Yes

存储条件上：冷藏存储
 运输分类：非危险品

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Monday March 15, 2010

	SPI #	单价/套	库存
2 x 15ml	04180-AB	$ 158.00	Yes
测试带 (Pk of 10)	04181-AB	35.90	Yes